用于純化回收100bp及以上的DNA片段,操作簡捷快速、回收效率高,回收后的DNA產物不含引物、蛋白、單核苷酸、熒光染料或放射性同位素標記的單核苷酸,可直接應用于基因測序、連接、酶切、限制性分析、體外轉錄、Southern印跡雜交等各種分子生物學實驗。
操作流程(示意圖):
磁珠法PCR產物純化試劑盒的應用實例見下。
1)醫脈賽(EmerTher)磁珠法PCR產物純化試劑盒純化PCR產物
2)磁珠法PCR產物純化試劑盒與某金標準品牌PCR產物純化試劑盒對比
3)磁珠法PCR產物純化試劑盒分別純化50bp長度產物和1kp長度產物
目錄號 | 規格 | 適用機型 |
---|---|---|
DF02001 | 1.8ml(適用50份樣品) | 略 |
DF02001 | 18ml(適用500份樣品) | 略 |
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【手工提取步驟】
1. 取 20μl PCR樣品于2.0ml離心管中,加入36μl磁珠,溫和吸打幾次或溫和搖動混合均勻3-5min;
[注意:操作過程中請勿顛倒混合!避免液體粘附于離心管管壁導致微量樣品損失,降低回收率。]
2. 用磁分離架吸附磁珠20s,棄上清;
3. 加入100μl洗滌液(70%乙醇),溫和吸打混合均勻1min;洗滌磁珠,吸附磁珠,棄上清;
4. 加入100μl洗滌液(70%乙醇),溫和吸打混合均勻1min;
5. 吸附磁珠,棄上清;將殘留液體棄去,再次棄上清;
6. 靜置2-3min,盡量使乙醇揮發完全;
7. 加入20μl洗脫液進行洗脫,溫和搖動混合均勻2-3min;
8. 磁場吸附磁珠,回收含PCR產物的洗脫液至另一干凈離心管內,進行檢測及后續實驗。
1、PCR樣品或其他DNA樣本使用量能否改變?
答:需加入1.8倍體積的核酸提取磁珠,其它試劑也可等比例增加,實驗步驟不變。
2、操作過程中能否劇烈混合?
答:磁珠高效特異吸附DNA片段,操作過程中請勿顛倒混合!避免液體粘附于離心管管壁導致微量樣品損失,降低回收率。
3、乙醇殘留太多是否會對后續檢測有一定影響?
答:洗滌液洗滌后,盡量將殘留液體去除后,讓樣品靜置3-5min左右以揮發乙醇,將殘留液體棄去然后加入洗脫液。如乙醇殘留太多會對后續檢測有一定影響;但樣品如果
過于干燥,可能導致DNA不容易從磁珠上洗脫下來,減少提取量。